超微量紫外分光光度计已成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器对于一般的分光光度法,其浓度测量的相对误差在1~3%范围内,如采用示差分光光度法进行测量,则误差可减少到0.1%。
什么是光度重复性?
仪器冷态开机,预热0.5h后,对标准样品或使用者自选的样品进行光谱扫描,而后在谱图上选择几个特征吸收峰,检查在选定的测量次数内,各个峰值的之差即为光度重复性。
影响光度重复性的主要因素
影响超微量紫外分光光度计光度重复性的主要因素有以下几种。
1、光源系统
光源系统即指灯泡和电源,如果氘灯或钨灯灯泡本身的质量不好,即使电源很好,氘灯或钨灯发出的光通量肯定不稳。这样,分光光度计就不可能得到好的、稳定的测试结果。如果氘灯或钨灯的灯泡很好,但其电源不稳,那么光源系统(灯泡)发出的光通量也不可能稳,也不可能得到好的光度重复性。
2、光电转换器系统
光电转换器系统包括光电转换元件及其供电电源,光电转换元件是将光信号转换成电信号的关键元件。不管分光光度计的其他元部件多好,如果光电转换元件不好,就不可能得到好的光度重复性。
3、如果光电转换元件很好,其供电电源不好,电源一直在波动或漂移,也不可能得到好的光度重复性。因此,超微量紫外分光光度计的制造者和使用者一定要高度重视光电转换器系统对光度重复性的影响。