紫外分光光度计的工作原理是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门,分光光度计督有广泛而重要的应用。
紫外分光光度计常用于定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。
紫外分光光度计对工作环境的要求如下。
①仪器应安放在干燥的房间内,使用温度为5-35℃.相对湿度不超过85%。
②仪器应放置在坚固平稳的工作台上,且避免强烈的振动或持续的振动。
③室内照明不宜太强,且应避免直射日光的照射。
④电扇不宜直接向仪器吹风,以防止光源灯因发光不稳定而影响仪器的正常使用。
⑤尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。
⑥供给仪器的电源电压为AC220V±22V,频率为50Hz±1Hz,并必须装有良好的接地线。推荐使用功率为1000w以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器,以加强仪器的抗干扰性能。
⑦避免在有硫化氢等腐蚀性气体的场所使用。