紫外分光光度计使用期间为了获得准确的研究结果，准确测量样品溶液的吸光度非常重要。通常，分析结果的不可靠性与偶然误差和系统误差有关。偶然误差会影响测量精度，可通过足够数量的统计处理来减少;系统误差影响测量结果的准确性。
通过比较大致相同实验条件下物质的准确测量结果，可以检查和校正系统误差(波长校正、分光光度计的慢像散、放大器的线性响应、暗电流和反应杯的光路)和操作误差(温度变化、仪器读数、操作员变化、纯度、所用物质的称重和浓度、pH)的影响。在大多数情况下，通过严格遵守操作程序，将仪器调零并准确称重，可以控制或减少操作误差。通过定期校准分光光度计，可以克服仪器的系统误差。如果需要高精度测量，必须每天校准。
紫外分光光度计在使用过程中需要定期清洁，确保环境卫生，注意防尘。操作环境中的浮尘和腐蚀性气体会影响紫外分光光度计机械系统的灵活性，降低各限位开关、钥匙和光电耦合器的可靠性和灵敏度，也会导致部分零件的铝膜腐蚀。
使用过程中应注意防潮和防潮。温度和湿度是影响仪器性能的关键因素。空气中水分过多会使机械部件生锈，影响金属镜面的光洁度，并导致机械部件产生误差可能会严重影响性能;镜子、光栅、聚焦透镜等光学元件的铝膜可能生锈，也可能出现杂散光、光能不足、噪声等故障。更严重的是，仪器可能无法运行，使用时间可能会缩短。因此，除了维护期间的定期校准外，还应配备一个四季恒湿的仪器室，并配备恒温设备，尤其是在南方潮湿地区的实验室。
使用仪器一段时间后，仪器内部会积聚一些杂尘。由专业维修技术人员或在工程师的指导下，定期打开仪表盖，对内部灰尘进行清理和清除。此时，重新拧紧各加热元件的散热器，清洁光学盒的密封窗，清洁并润滑机械部分，校准光路，在测试和校准前安装仪器，使用前观察仪器是否恢复正常。
