荧光定量pcr仪由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。
荧光定量pcr仪作为一种高精度检测仪器,长期使用必须注意及时维护保养工作。那么荧光定量仪器的日常清理和保养应该怎么做呢?下面,艾泰赫生化科技为大家详细讲解一下。
1、仪器外部清洁
用洁净毛巾擦拭仪器外壳,将仪器挪开原先的位置,清理仪器下面的桌面,以免桌面上积攒的灰尘等杂物堵住通风口。
检查荧光定量PCR仪进风口以及出风口是否通畅(具体位置可参见仪器厂家的说明书),以免通风口被灰尘、纤维等杂物堵塞而造成散热不好,从而影响仪器升降温速度和温控精度。
仪器周围需要留出一定的空间以保证良好的通风散热,具体要求可参见仪器厂家的说明书,德国耶拿公司的PCR仪背部要求留出10cm的空间,但侧面不排风,因此仪器左右两侧可以近距离放置其他仪器设备,节省实验室空间。
2、样品槽清洁
检查荧光定量PCR仪样品槽是否洁净,可用蘸有70%-75%的棉签擦拭样品孔,再在25℃下运行3min,以蒸干槽内的酒精溶液。定期清洁样品槽,建议半年1次。
若是定量PCR仪,样品孔中若被带有荧光染料的样品溶液污染,会影响实际样品的检测结果,所以更需要保证样品槽的洁净,建议3个月一次。
3、热盖清洁
检查热盖是否能够卡紧扣好,以保证程序运行过程中样品没有蒸发现象。
PCR管盖上的记号笔标记容易在热盖上留下印渍,可定期用蘸有70%-75%酒精的柔软洁净布进行擦拭,并将热盖升温至99℃保温3min,以去除酒精残留。
4、测温
样品槽温度的均一性和准确性关乎实验结果的好坏,建议由专业的售后工程师定期对样品槽进行温度测定,以保证仪器温控性能正常(尤其是使用3年以上的仪器)。
荧光定量PCR仪在运行过程中,禁止强行切断电源来结束程序(突遇停电等意外除外),因为电源切断后,风扇强制停止,导致仪器内部元器件散热不顺畅,影响元器件使用寿命。